期刊简介
本刊由上海第二医科大学主办，上海第二医科大学附属仁济医院、上海市消化疾病研究所编辑出版。本刊作为消化专业综合性学术刊物，将及时传递国内外最新学术信息，登载优秀的研究论著、文献综述和述评，对不同学术观点兼收并蓄，突出科学性和严肃性，为消化学病领域内研究成果和信息的交流与沟通提供园地。此外，本刊还开设专家论坛、特约/国外来稿、短篇论著、临床交流、诊疗技术、讲座、会议纪要、共识意见、学术争鸣、病例分析与个案报道等栏目。
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首页>胃肠病学杂志
- 杂志名称：胃肠病学杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：上海交通大学医学院附属仁济医院
- 国际刊号：1008-7125
- 国内刊号：31-1797/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 文摘与引文数据库, 医学文摘, 万方收录(中)
幽门螺杆菌热休克蛋白60核酸疫苗的构建和免疫原性鉴定
徐灿；李兆申；杜奕奇；屠振兴；龚燕芳；金晶；吴红玉；许国铭
关键词：螺杆菌, 幽门, 疫苗, DNA, 遗传载体, 热休克蛋白60
摘要：背景:核酸疫苗是新兴的第三代疫苗.目前幽门螺杆菌(H.pylori)疫苗的研究主要集中在减毒、灭活和亚单位疫苗方面,有关H.pylori核酸疫苗的研究罕见报道.目的:构建含H.pylori热休克蛋白60(hsp60)基因的核酸疫苗,并鉴定其表达蛋白的免疫原性.方法:抽提H.pylori标准菌株CCUG17874基因组DNA为模板,应用聚合酶链反应(PCR)扩增hsp60基因并插入测序载体pUCmT,测定插入的hsp60基因的核苷酸序列.通过一系列酶切、连接反应将hsp60基因克隆入真核表达载体pIRES,然后转化入感受态大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆,行酶切和PCR鉴定.采用脂质体法将所构建的重组载体pIRES-hsp60转染真核细胞COS-7,蛋白质印迹法(Western blotting)检测pIRES-hsp60表达蛋白的免疫原性.结果:以H.pylori基因组DNA为模板,PCR扩增出约1640 bp的hsp60基因片断,测序结果表明其与GenBank中H.pylori hsp60原序列的同源性达98%.酶切和PCR鉴定结果证实hsp60基因已克隆入真核表达载体pIRES,成功构建了含hsp60基因的H.pylori核酸疫苗pIRES-hsp60.蛋白质印迹法检测显示经pIRES-hsp60转染的COS-7细胞在约60 kDa(1 Da=0.992 1 u)处出现特异性蛋白条带.结论:成功构建了具有免疫原性的含hsp60基因的H.pylori核酸疫苗,为进一步探索其免疫作用奠定了基础.
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